4.洗眼器。应根据实验活动内容,确定是否需要安装洗眼器。如果需要洗眼器,则应安装在BSL-2实验室内靠近出口的地方。
(三)BSL-3实验室
1.生物安全柜。BSL-3实验室必须安装和使用生物安全柜,应根据病原微生物试验活动内容的不同,选择不同型别的生物安全柜。
2.高压灭菌器。在BSL-3实验室的半污染区和清洁区之间,宜安装双扉生物安全型高压灭菌器,即高压灭菌器跨墙安装,双门互锁结构,且对高压产生的蒸汽具有回收再高压的性能。高压灭菌器的安装,必须确保高压灭菌器与墙体之间的密封,不能有一点泄漏。
污染区内应设置不排蒸汽的高压蒸汽灭菌器或其他消毒装置。
3.离心机安全罩。是否需要离心机安全罩,取决于离心机的类型。如果是传统型的离心机,最好安装离心机安全罩;如果离心机是新式生物安全型的,即负压离心机或有离心杯帽的离心机,则不需要离心机安全罩。离心机和安全罩宜靠近排风口。
4.洗手装置。应在污染区和半污染区出口处设洗手装置。洗手装置的供水应为非手动开关。供水管应安装防回流装置。不得在实验室内安设地漏。下水道应与建筑物的下水管线完全隔离,且有明显标识。下水应直接通往独立的液体消毒系统集中收集,经有效消毒后处置。
七、个人防护
(一)个人防护要求
个人防护的内容包括防护用品和防护操作程序。实验室所有人员必须经过个人防护的必要培训,考核合格获得相应资质,熟悉所从事工作的风险和实验室特殊要求后方可进入实验室工作。实验室应按照分区实施相应等级的个人防护。实验室操作必须严格遵守个人防护原则。不同生物安全等级实验室的个人防护要求如下:
1.BSL-1实验室。工作人员进入实验室应穿工作服,实验操作时应戴手套,必要时佩戴防护眼镜。离开实验室时,工作服必须脱下并留在实验区内。不得穿工作服进入办公区等清洁区域。用过的工作服应定期消毒。
2.BSL-2实验室。BSL-2除符合BSL-1的要求外,还应该符合下列要求:进入实验室时,应在工作服外加罩衫或穿防护服,戴帽子、口罩。一次性手套不得清洗和再次使用。当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行,而必须采取外部操作时,为防止感染性材料溅出或雾化危害,必须使用面部保护装置,如护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备。
3.BSL-3实验室。BSL-3实验室的个人防护除符合BSL-2的要求外,还应该符合下列要求。
(1)工作人员在进入实验室时必须使用个体防护装备,包括两层防护服、两层手套、生物安全专业防护口罩(不应使用医用外科口罩等),必要时佩戴眼罩、呼吸保护装置等。
工作完毕必须脱下工作服,不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。
(2)在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂和生理盐水,且易于取用。实验室区域内应配备应急药品。
(二)个人防护装备
实验室工作人员必须按国家规定做好个人防护。实验室所用任何个人防护装备应符合国家有关标准的要求。在危害评估的基础上,按不同级别的防护要求选择适当的个人防护装备。实验室对个人防护装备的选择、使用、维护应有明确的书面规定、程序和使用指导。
个人防护装备主要包括眼睛、头面、呼吸、手部、躯体、足部和听力防护装备等,以下对常用的装备的原理、使用原则和要求进行简要的介绍。在具体使用时,应根据国家的有关标准、要求以及产品的说明进行。
1.眼睛防护装备。
(1)安全眼镜和护目镜。在所有易发生潜在眼睛损伤(由物理、化学和生物因素引起)的生物安全实验室中工作时,必须采取眼睛防护措施。此要求不仅适用于在实验室中长时间工作的人员,同时也适用于进入实验室进行仪器设备维修保养的工作人员。所有的眼睛防护装备技术质量要求应该符合有关质量标准的规定。眼睛防护设备主要包括安全眼镜和护目镜。安全眼镜主要是由制备屈光眼镜或平光眼镜配以专门镜框,将镜片从镜框前面装上,镜框用可弯曲的或侧面有护罩的防碎材料制成。所选的眼睛防护装备的类型取决于外界危害因子对眼睛危害程度。在大多数情况下,佩戴侧面带有护罩的安全眼镜就可以达到防护的目的。当在进行有可能发生化学和生物污染物质溅出的实验时,必须佩戴护目镜。
护目镜应该戴在常规视力矫正眼镜或角膜接触镜(它们对生物学危害没有保护作用)的外面,以对飞溅和撞击提供保护。当在进行更为危险的实验时,如进行有潜在爆炸的反应和使用或混合强腐蚀性和强酸溶液时,必须佩戴面罩或同时佩戴面罩和护目镜或安全眼镜。
工作人员如果不需要使用经矫正的透镜,可以直接佩戴塑料安全眼镜。需要使用经矫正的透镜,则应根据配镜处方选择合适的安全镜架。建议工作人员在生物安全实验室中工作时不佩戴角膜接触镜,因为如果腐蚀性液体溅至眼睛,本能反射会使眼睑关闭而使取出角膜接触镜更为困难,因此,如果可能的话,在眼睛受到损害前卸下角膜接触镜;另外,实验室中某些水汽能透过角膜接触镜,水汽能渗入镜片的背面并引起广泛的刺激;再者,镜片能阻碍眼泪洗去刺激物。如果国家相关部门对佩戴角膜接触镜没有强制规定,也必须要使用特殊设计的护目镜加以保护。
如果在佩戴角膜接触镜时由化学水汽接触了眼睛,应该遵循以下几个处理步骤。
①立即卸除角膜接触镜镜片。
②用洗眼器持续冲洗眼睛,至少15min。
③及时去医院求诊。
安全眼镜能够保护工作人员避免受到大部分实验室操作所带来的损害,但是对某些特殊的操作如腐蚀性液体喷溅出或细小颗粒飞溅出时,佩戴安全眼镜显然是不够安全的。又如在用铬酸类溶液洗涤玻璃器皿、碾磨物品或在使用玻璃器皿进行极具爆破或破损危害(例如在压力或温度突然增加或降低的情况下)的实验室操作时,在这些情况下,有必要保护整个面部和喉部,应该佩戴护目镜或面罩。不得戴眼镜防护装备(安全目镜、护目镜或面罩)离开实验室区域。
(2)洗眼装置。实验室内(BSL-2和BSL-3)应配备紧急洗眼装置或淋浴设施。洗眼装置应安装在室内明显和易取的地方,并保持洗眼水管的通畅,便于工作人员紧急时使用。工作人员应掌握其操作方法。当在实验工作中遵循了所有应注意的事项以后,如发生腐蚀性液体或生物危险液体喷溅至工作人员的眼睛时,工作人员应该(或在同事的帮助下)在就近的洗眼台(洗眼装置)用大量缓流清水冲洗眼睛表面至少15~30min。
(3)淋浴和应急消毒喷淋装置。BSL-2实验室在必要时应有应急喷淋装置;BSL-3实验室应在清洁区设置淋浴装置,必要时在半污染区设置应急消毒喷淋装置。这些装置应保持管道的通畅。必须告知工作人员应急消毒喷淋装置的摆放位置并培训其操作方法。在使用中可用大量冷水淋洗污染的部位,至少需要20min。如果为化学物品溅出污染,需用大量急水冲洗。
2.头面部防护装备。
(1)口罩。外科口罩仅可以保护部分面部免受生物危害物质,如血液、体液、分泌液以及排泄物等喷物的污染,适用于BSL-1或BSL-2实验室中使用。一般在使用时可同时佩戴面罩,以组合使用的方法保护整个面部。值得注意的是:外科口罩在设计上只能保护病人,而单独使用不能对工作人员提供呼吸保护。
(2)防护面罩。防护面罩可用防碎塑料制成,其形状应与脸型相配,通过头带或帽子佩戴,有一次性和耐用型面罩。为保护实验室工作人员免遭脸部碰撞或切割伤、血液、体液、分泌液、排泄物或其他感染性物质的飞溅或滴液接触至脸部和/或污染眼睛、鼻子以及口的危害,要求工作人员在实验室必须佩戴口罩、护目镜、安全镜或简易面罩。若需要对整个脸部进行防护则必须使用一种标准的防护面罩以罩住整个脸部,或使用口罩加护目镜(或口罩加安全镜)。在进行有可能产生样本喷溅出时应佩戴标准防护面罩。在使用防护面罩时,常同时佩带安全镜或护目镜或口罩。实验完毕后必须先摘下手套,然后用手卸下防护面罩。
(3)防护帽。在生物安全实验室中佩戴由无纺布制成的一次性简易防护帽,可以保护工作人员避免化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)所造成的污染。因此,要求工作人员在实验操作时应佩带防护帽,避免由于化学和生物危害物质飞溅至头部(头发)所造成的污染。
3.呼吸防护装备。呼吸防护的有效装备为防护面具,主要有正压面罩、个人呼吸器和正压防护服三种。在进行高度危险性的操作(如清理溢出的感染性物质和气溶胶)时,可以采用防护面具来进行防护,应根据危险类型来选择防护面具。在一般的防护面具中装有一种可更换的过滤器,可以保护戴者免受气体、蒸汽、颗粒和微生物以及气溶胶损害。
但过滤器必须与防护面具的正确类型相配套。为了达到理想的防护效果,每一个防护面具都应与操作者的面部适合,面型适合度需经过测试。也有设计用来保护实验人员避免生物因子暴露的一次性防护面具(空气纯化防护面具)以及供气防护面具(或正压防护服)。
防护面具使用完毕后未经消毒禁止带出实验室区域。同时应进行工作场所监控、医学评估和对呼吸器使用者的监督,以确保其始终正确使用该类设备。同时应对呼吸器作个体适应性测试。
(1)个人呼吸器的使用要点。a.佩戴时选择合适和合格的个人呼吸器,遮盖住鼻、口和下鄂。b.用橡皮筋(松紧带)固定在头部。c.调整在合适的面部位置并加以检验。d.吸气时个人呼吸器应该有塌陷。e.呼气时呼吸器周围不应该漏气。f.卸下口罩时首先提起呼吸器下方橡皮筋(松紧带)越过头部,然后提起呼吸器上方橡皮筋(松紧带)使呼吸器脱离面部,值得注意的是一次性个人呼吸器使用完毕后应先消毒再丢弃。
(2)正压面罩。在进行高度危险性的操作(如清理溢出的感染性物质和气溶胶)时,可以采用正压面罩来进行防护。根据危险类型来选择正压面罩,可以保护佩戴者免受气体,蒸汽、颗粒和微生物以及气溶胶损害。它的使用将会妨碍佩戴眼镜。正压面罩使用完毕后未经消毒禁止带出实验室区域。同时应进行工作场所监控、医学评估和对呼吸器使用者的监督,以确保其始终正确使用该类装备。正压面罩(也称头盔正压式呼吸防护系统)除对呼吸系统防护外,还可提供眼睛、面部和头部防护。
①正压式呼吸防护系统包括:普通头盔、安全帽头盔(可配肩罩)。
②双管供气式呼吸防护系统包括:前置式、背置式、全面具、半面具。
③电动式呼吸防护系统:电动式送风过滤系统、电动式送风防尘系统。电动式呼吸防护系统可提供高等级安全防护,集多种防护为一体,电动送风无呼吸阻力,无压缩空气管限制活动空间。
④正压面罩的装配要点。a.由头盔(安全帽头盔、安全帽头盔加配肩罩)、呼吸管、高压空气调节装置、高压空气管和压缩空气过滤及调节控制板组合使用。b.装配时就注意各部件之间的紧密连接,注意其气密性。c.有可供选择的升降温系统、提供适宜温度、流量的呼吸空气。有利于长时间佩带。d.可同时供3人最多5人同时使用,可调节压力、流量和温度。e.头盔内的气流设计。头盔分为普通头盔、安全帽头盔和安全帽头盔加配肩罩三种类型。所设计的瀑布式气流为呼吸区域提供稳定的气流:空气从呼吸管进入头罩前部,经头罩底部流出;肩罩内颈箍及正压气流防止污染空气进入头罩。f.正压面罩的使用要点。
颈箍方便头罩佩戴与脱卸;内衬和外肩罩可提供双重保护,可防止污染物渗入或溅入。将内衬塞入工作服内,使多余的空气导入工作服;应调节头箍以保证头罩佩戴稳固,使头罩跟随头部转动,活动力自如;外置搭扣应负载视窗顶部,使头箍与安全帽连接好。
4.手部防护装备。
(1)手套。手部防护装备主要使用手套。在实验室工作时应戴好手套以防止生物危害、化学品、辐射污染、冷和热、产品污染、刺伤、擦伤和动物抓、咬伤等。在生物安全实验室中处理化学溶剂或去垢剂或接触感染性物质、血液、体液、分泌液、渗出液以及接触黏膜和受损皮肤时,必须使用合适的手套以保护工作人员免受污染物溅出或生物污染造成的伤害。如果手套被污染,则应该尽早更换。手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐磨、耐扎和耐撕的要求,并应对所涉及的危险提供足够的防护。应对实验室工作人员进行手套选择、使用前及使用后的佩戴及摘除等培训。然而必须清醒地认识到,迄今为止还没有一种手套能够保护工作人员免遭所有化学物质的损害。因此要选择不同用途的手套。规范的使用手套方法应该包括以下几个要点。
①手套的选择。生物安全实验室一般使用乳橡胶(latex)或聚腈类(nitrle)或聚氯乙烯(vinyl)手套,用于对强酸、强碱、有机溶剂等有害物质的防护。大多数实验人员使用乳胶手套,对乳胶手套及滑石粉过敏者可使用氯乙烯或聚腈类手套。使用耐热材料(皮制品)制成的手套可以接触高温物体,应该将该类手套放置在烤箱或膛式炉附近以方便使用。
决不能用橡胶或塑料手套接触高温物体。应该使用特珠的绝缘手套处理极冷的物体如液氮或干冰。在进行尸体解剖等可以接触尖锐器械时,应戴不锈钢网孔手套以防止切割损伤,但不能防止针刺损伤。
②手套的检查。在使用手套前应该检查手套是否褪色、穿孔(漏损)和有裂缝。可以通过充气试验(可以浸入水中观察是否有气泡)来检查手套的质量。
③手套的使用。一般情况下,佩戴一副手套即可(BSL-1和BSL-2实验室),若在生物安全柜中操作感染性物质时实验室(BSL-3),应该佩戴两副手套。在操作过程中,外层手套被污染时应立即用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在生物安全柜中的高压灭菌袋中,并立即戴上新手套继续实验。戴好手套后应完全遮住手及腕部,如必要可覆盖实验服衣袖。